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实时荧光定量检测

荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用。它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程。随着 PCR 反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,结合相应的软件可以对产物进行分析,从而得到一条荧光扩增曲线,计算待测样品的初始模版。实时荧光定量PCR技术是一次由DNA定量技术的飞跃。运用该项技术,我们可以对DNA 、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。

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